Лабораторная диагностика туберкулеза крупного рогатого скота, основанная на классических методах выделения культуры и биохимической идентификации микобактерий, длительна, ресурсозатратна и не всегда позволяет провести точную внутривидовую дифференциацию. Целью исследования была разработка и апробация экспресс-метода видовой идентификации бактерий рода Mycobacterium на основе анализа спектров ультрафиолетовой резонансной рамановской спектроскопии (УФ РКР) целых клеток. Исследование 29 штаммов показало, что использование двух длин волн возбуждения (248 нм и 251 нм) позволяет селективно анализировать белково-липидный комплекс и нуклеиновые кислоты клетки. Для количественной идентификации предложены два высокоспецифичных спектральных индекса: I 1660 /I 1615 (C = O/Tyr), чувствительный к составу липидов и вторичной структуре белков, и I 1480 /I 1309 (G/A), коррелирующий с геномным GC-составом. Метод обеспечивает достоверную дифференциацию, в том числе внутри комплекса M. tuberculosis (например, между M. tuberculosis и M. bovis), с сохранением точности после щадящей инактивации патогенов и независимо от фазы роста культуры, это открывает перспективы для его внедрения в практику ветеринарных лабораторий.
микобактерии, ультрафиолетовая резонансная спектроскопия комбинационного рассеяния, видовая идентификация, макромолекулярный состав, многомерный статистический анализ, mycobacterium bovis, туберкулез
1. Денгис Н.А., Власенко В.С., Борисов Е.С. Эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота в Омской области // Вестник КрасГАУ. 2024. № 3(204). С. 108-114. DOI:https://doi.org/10.36718/1819-4036-2024-3-108-114 EDN: https://elibrary.ru/ZQPXAB
2. Ветеринарные правила осуществления профилактических, диагностических, ограничительных и иных мероприятий, установления и отмены карантина и иных ограничений, направленных на предотвращение распространения и ликвидацию очагов туберкулеза. Утв. приказом Минсельхоза России № 534, от 08.09.2020 // Кодекс: справочно-правовая система. URL: https://docs.cntd.ru/document/565721619 (дата обращения: 28.11.2025).
3. Проблемы лабораторной диагностики и идентификации видов микобактерий / В.Х. Фазылов, И.В. Петров, Л.В. Петрова [и др.] // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2021. Т. 10, № 3. С. 118-126. DOI:https://doi.org/10.33029/2305-3496-2021-10-3-118-126 EDN: https://elibrary.ru/EJSHHS
4. Значение L-форм микобактерий при диагностике туберкулеза животных / А.Х. Найманов, В.М. Калмыков, М.С. Калмыкова [и др.] // Ветеринария и кормление. 2018. № 2. С. 67-70. EDN: https://elibrary.ru/XNHSTJ
5. Formation and resuscitation of "non-culturable" cells of Rhodococcus rhodochrous and Mycobacterium tuberculosis in prolonged stationary phase / M.O. Shleeva [et al.] // Microbiology (Reading). 2002. 148(Pt 5). P. 1581-1591. DOI:https://doi.org/10.1099/00221287-148-5-1581 EDN: https://elibrary.ru/LHFHDB
6. Применение метода ПЦР в реальном времени для диагностики бактериальных инфекций животных / О.М. Швец [и др.] // Вестник Курской государственной сельскохозяйственной академии. 2024. №. 2. С. 145-148. EDN: https://elibrary.ru/GHYZLK
7. Калмыкова М.С. Сравнительное испытание тест-систем для ПЦР-диагностики туберкулеза животных // Ветеринарная патология. 2006. № 3 (18). С. 151-155. EDN: https://elibrary.ru/OEDQVV
8. Comparison of PCR and culture for detection of Mycobacterium bovis in clinical samples from cattle / C.A. Cosgrove [et al.] // Journal of Clinical Microbiology. 2022. Vol. 60(4). e02512-21.
9. СанПиН 3.3686-21 Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней. М., 2021.
10. An intelligent background-correction algorithm for highly fluorescent samples in Raman spectroscopy / Z.M. Zhang [et al.] // Journal of Raman Spectroscopy. 2010. Vol. 41(6). P. 659-669. EDN: https://elibrary.ru/OBPYYV
11. Асанов Н.У., Макарова Е.А. Ультрафиолетовая резонансная Рамановская спектроскопия белков и нуклеиновых кислот // Успехи биологической химии. 2023. Т. 63. С. 189-220.
12. The biochemical origins of the surface-enhanced Raman spectra of bacteria: a metabolomics profiling by SERS / W.R. Premasiri [et al.] // Analytical and Bioanalytical Chemistry. 2016. Vol. 408(17). P. 4631-4647. DOI:https://doi.org/10.1007/s00216-016-9540-x EDN: https://elibrary.ru/DFEYGX
13. Laser tweezers Raman spectroscopy for in situ analysis of microbial cells / Y. Xie [et al.] // Frontiers in Microbiology. 2022. Vol. 13. 767178.
14. Salimova N., Gryadunov D. Молекулярно-генетическая характеристика штаммов mycobacterium tuberculosis, выделенных от впервые выявленных больных туберкулезом в Республике Азербайджан //Bulletin of the Academy of Sciences of Moldova. Medical Sciences. 2024. Т. 79. №. 2. С. 30-36. DOI:https://doi.org/10.52692/1857-0011.2024.2-79.04 EDN: https://elibrary.ru/FGKPBN
15. Старкова Д.А., Нарвская О.В. Генетические детерминанты вирулентности и лекарственной устойчивости Mycobacterium avium subsp. hominissuis - возбудителя микобактериоза человека // Инфекция и иммунитет. 2020. Т. 10, No 1. С. 26-34. DOI:https://doi.org/10.15789/2220-7619-GDO-1220 EDN: https://elibrary.ru/SEOMES
